树突状细胞（DC细胞）与T细胞的相互作用在肿瘤治疗中扮演着至关重要的角色。研究显示，骨髓来源的DC细胞（BMDCs）能够诱导出CD103+CD8+组织驻留记忆T细胞亚型，进而增强生殖道局部肿瘤的控制能力。此外，半乳糖酸的阻断进一步提高了BMDCs诱导抗原特异性CD8+T细胞增殖的能力。全转录组基因表达分析显示，仿硅酸处理能够诱导BMDCs中参与T细胞活化、细胞粘附及细胞间相互作用的基因差异表达。

细胞聚类测定和单细胞嗜性测量的结果表明，糖基化减少的BMDC与CD8+T细胞之间形成了更高的嗜性相互作用。DC细胞在完成抗原呈递后，如何在CD8+T细胞的激活与靶细胞的杀伤过程中发挥协作和调控功能，成为当前研究的热点之一。同时，活化的CD8+T细胞记忆功能分群的变化与其乳酸化、棕榈酸化等代谢过程之间的关系也备受关注。为了评估CD8+T细胞的杀伤功能，本期将提供DC细胞活化下的CD8+T细胞及其杀伤功能检测的解决方案。

实验原理简介

DC细胞作为已知功能最强的抗原呈递细胞（APC），能够摄取、消化外源抗原，并将其以MHC分子形式呈递给CD4+和CD8+T细胞，诱导免疫反应。通过共培养DC细胞与CD8+T细胞，模拟体内CD8+T细胞的激活过程，这一模型在CD8+T细胞研究中不可或缺。具体而言，当具有抗原肽-MHCⅠ复合物的DC细胞与CD8+T细胞共培养时，CD8+T细胞通过其表面的T细胞受体（TCR）与DC细胞上的抗原肽-MHCⅠ复合物结合而被激活。活化后的CD8+T细胞（细胞毒性T细胞）可以通过分泌穿孔素和颗粒酶等溶解介质，或者通过Fas配体与靶细胞Fas受体的结合，触发靶细胞的凋亡程序。

实验结果展示

DC细胞体外培养与促成熟

流式细胞术检测表明，经过促成熟和成熟诱导培养后，C57小鼠骨髓细胞转化为成熟的DC细胞，MHCII/CD80/CD40/CD86的表达水平显著升高。

CD8+T细胞的分选及激活培养

使用EasySort™ Mouse CD8+ T Cell Isolation Kit对来自C57小鼠脾脏的CD8+T细胞进行分选，并通过流式细胞术分析其纯度。随后，将灭活的靶细胞（Raw2647）与分选的CD8+T细胞共培养72小时，以检测CD8+T细胞的增殖情况。

CD8+T细胞杀伤靶细胞的凋亡检测

增殖后的T细胞与靶细胞（Raw2647）按照1:10比例共培养24小时，通过流式细胞术检测靶细胞中Caspase3酶活性的变化。结果显示，相比于Control组，共培养组的Caspase3酶激活比例显著增加。此外，ELISA也显示，实验组的细胞因子IFN-γ、IL-2、TNF-α的表达明显高于对照组。

实验方案及操作流程

DC细胞的体外培养：取小鼠骨髓细胞，用分化培养基培养6天，再用成熟培养基培养24小时。详细操作流程可参考“Mouse Bone Marrow-derived Dendritic Cells (BMDC) Induction and Identification Kit”（货号：XJM003）。随后，通过80℃水浴加热灭活Raw2647细胞4小时，进行离心洗涤，最后用1640全培养基重悬细胞并计数。

CD8+T细胞的分选及抗原提呈：取C57小鼠脾脏细胞，用EasySort™ Mouse CD8+ T Cell Isolation Kit进行细胞分选，并通过CFSE染色标记分选后的T细胞。然后，将CFSE标记的T细胞与BMDC按10:1比例混合培养72小时，以观察T细胞增殖情况。

最后，将靶细胞与T细胞混合培养，并检测靶细胞凋亡情况，同时使用ELISA检测培养上清中细胞因子的表达。

以上实验方案均采用了鸿运国际的相关实验产品，如有关于实验内容的更多细节需求，欢迎与我们的技术团队交流，我们将乐意为您提供支持！

品牌产品包括：

• Mouse Bone Marrow-derived Dendritic Cells (BMDC) Induction and Identification Kit - 货号：XJM003
• EasySort™ Mouse CD8+ T Cell Isolation Kit - 货号：MIM003N
• ELISA试剂盒 - 货号：E-HSEL-M0007, E-MSEL-M0036, E-HSEL-M0009

我们还提供多种细胞凋亡的诱导剂及模型，以供外部研究参考，如有需要，请随时联系鸿运国际进行更多的了解与咨询！